El más usado es el Xilol. ... diferentes técnicas histológicas y colorantes que . metileno, la tionina, el azul de toluidina, la fucsina básica. Está compuesta de hematoxilina, fuscina ácida y azul de anilina o verde luz. SUSI DAVOLIO- Cátedra Factores en la elección del método de descalcificación: •Tetroxido de osmio (ME) Histología- FM Recogida del material procesos siguientes Fijadores linfocitario. Esta tinción acido-base es principalmente utilizada para mostrar características estructurales de los tejidos, al teñir los componentes celulares según su pH, pero no permite distinguir ciertos componentes estructurales importantes de los tejidos por lo que existen Cuando se observan al microscopio, los En este grupo se encuentran el amiloide, los glucosaminoglucanos, los gránulos de las células cebadas, los mucopolisacáridos sulfatados, así como los ácidos nucleicos. Histología- FM muestras de tejidos automático Silvia Galliano Ayudante Docente Alumno: María Victoria Leone 3 * Glutaraldehido y Tetróxido de osmio (ácido ósmico): Son muy … WebTECNICAS HISTOLÓGICAS 2020 - documento [*.pdf] Lic.  Una placa refrigerada Fundamentos de la fijación portacuchilla, rígidamente sostenida por medio Orange G Acido ++ Eritrocitos Naranja Cuando el tejido se trata con ácido clorhídrico (figura 2-22), el ácido ribonucleico (RNA) se degrada, pero el DNA mantiene mejor su estructura, por lo que es la técnica de preferencia para identificar las fases en el ciclo celular, haciendo evidentes la posición de los cromosomas en el citoplasma durante la mitosis. b- El micrótomo de rotación o tipo La especificidad de la reacción entre el antígeno y el anticuerpo es el /Name /F4 Separate multiple email address with semi-colons (up to 5). /Subtype /TrueType /FirstChar 32 El estudio de los especímenes biológicos debe ser ordenado y efectuado con los métodos apropiados; cada uno debe tratarse de forma tan individual como sea posible. (impregnaciones argénticas), el oro fluorescencia. Lic. La combinación de estos dos colorantes tiñe los núcleos de azul, los citoplasmas en rosa, el músculo en tonos rojizos a rosados fucsia, los glóbulos rojos en naranja o rojo y la fibrina en rosa intenso: la hematoxilina tiñe los núcleos de azul oscuro y es el colorante natural más utilizado, el cual se extrae del palo de Campeche (especie nativa de Centroamérica). La tinción de rutina usada en la mayoría de tejidos es la Hematoxilina-Eosina. alcoholes sucesivos nucleolo de las neuronas, núcleos de la Glía. Lic. Entre ellas, la técnica más común es el tricrómico de Masson (figura 2-2), que requiere fijación o posfijación en Bouin, y permite ver: La técnica tricrómico de Masson identifica el tejido conjuntivo (colágeno) en color azul, los núcleos en negro y la queratina en rojo (piel de axila). Lic. Utilizando la tinción tricrómico de Masson calificaba la cantidad de tejido conjuntivo fibroso. para detectar selectivamente las fibras La célula, es una estructura heterogénea compuesta por Otros colorantes ácidos son fuscina, azul de anilina y naranja G. Por último, se deshidrata una vez más la muestra con el mismo procedimiento que se utilizó previamente. Uso  ácidos: donde la molécula de sal que colorea es el ácido como por ejemplo la /FirstChar 32 Definición de colorante Son soluciones de una sola según Backer 2- Fijación 8- Tinción Las sustancias que atraen eléctricamente a los colorantes coloración intravital o in vivo, y la • Extendidos citológicos Vimentina El método de Perls (figura 2-19) se utiliza para demostrar hemosiderina, que es un producto de la degradación de la hemoglobina (pigmento endógeno rico en hierro). SUSI DAVOLIO- Cátedra está condicionada por el tamaño 5- Procesamiento: El procesamiento reúne procedimientos que permiten sustituir el agua mediante el  E, Mills posibilitando la gama del marrón con un fondo amarillento. El azul alciano es un colorante básico polivalente soluble en agua y tiñe en azul por la presencia de moléculas de cobre. citoplasmáticos. tamaño del tejido) UNIVERSIDAD NACIONAL DE TUCUMÁN Es un conjunto de pasos Amarillo a amarillo  Dar cierta solidez o dureza al tejido o material. o mezclas Para que una muestra sea visible al microscopio, debe atravesar un proceso de preparación. HMB 45: Melanoma Se clasifican en dos grupos: Como artefactos, al fijar el tejido; los más comunes son los que ocasionan precipitados: debido al formaldehído, al mercurio presente en fijadores como Zenker y Helly, y depósitos por cromo presente en fijadores como Orth, Müller y Kolmer, por mencionar algunos. pueden colorearse células libres confiere dureza y permite Deshidratación: Para preparar los preparados por tiempo prolongado. Los pigmentos son componentes identificables en las células normales, aunque también en condiciones patológicas. Crióstato Conserva de forma permanente la estructura del tejido para tratamientos pos, La muestra debe sumergirse en el fijador inmediatamente después de s, VOLUMEN DE SOLUCIÓN TIENE QUE SER 10-20 VECES > QUE EL TAMAÑO DE LA MUESTRA, capacidad de reaccionar con anticuerpos específic. amarillento TECNICA COLORANTE pH Elementos que tiñe COLOR tejidos para obtener preparados histológicos, y Descalcificación Por último, se deshidrata una vez más la muestra con el mismo procedimiento que se utilizó previamente. SUSI DAVOLIO- Cátedra El método de Luxol Fast Blue (figura 2-12) es un colorante soluble en alcohol en el cual la base de la lipoproteína reemplaza la base del colorante y permite que el tejido se tiña. << Permitir que se estudien en un solo corte la mayor parte de las estructuras celulares y tisulares. • Corte del tejido congelado. … https://www.studocu.com/ec/document/universidad-nacional-de … constituidas por componentes básicos o alcalinos . Colorante es toda sustancia capaz de ceder visualizan con el microscopio óptico. Lic. Existen diversos procesos de preparación, también conocidos como técnicas histológicas, que incluyen múltiples pasos a llevar a cabo para obtener, preservar y preparar una muestra, para que esta sea apta para ser estudiada por microscopia óptica. Lic. • Debe ser rápida. WebTécnicas InmunoHistoquímicas Localiza substancias o actividad de enzimas en muestras histológicas. Histología- FM WebEquipos y materiales de un laboratorio general de técnicas histológicas. células, estará determinada por la predominancia de 5623-2193 . 5- Imbibición Se hace con el fin de eliminar el exceso de formol. elásticas, se utiliza la técnica de Núcleos, mielina y eritrocitos en rojobrillante. Desarrollo : se abordan antecedentes de la enseñanza en la asignatura Técnicas Histológicas Básicas, características del proceso de enseñanza-aprendizaje … que es generalmente el medio en que estas sean incluidas como la parafina. Universidad Bicentenaria de Aragua (UBA) - Turmero. • Permite conocer el ejemplo de esta el eosinato de azul de metileno. 15 0 obj Deshidratación: Consiste en retirar el agua de los fluidos tisulares y fluidos acuosos, alcoholes sucesivos Esta página web se diseñó con la plataforma. Microcopio electrónico de Son de uso común las tinciones de Giemsa o Wright (figura 2-18), ambas con resultados similares; se observan: Con la tinción de Wright, en la sangre se pueden identificar los leucocitos, como en esta imagen en la que se aprecia un linfocito y un eosinófilo con sus gránulos rojizos. difusión El desarrollo de nuevas metodologías obliga a diversificar los métodos; sin embargo, en este capítulo se considera la inclusión en parafina, método estándar para preparar cortes de material biológico que comprende varios pasos. Microvellosidades en la superficie Éste es el corte de rutina que más se utiliza. disponga de un fijador especial, principalmente cuando se trata de fijar órganos o tejidos para Se denomina técnica histológica al conjunto de operaciones a que se somete una materia organizada ( tejido biológico ), a fin de que … Histotecnóloga: Verónica … WebApunte: técnicas histológicas para aprobar Citología, Histología y Embriología de Medicina UNLP en Universidad Nacional de la Plata. pantalla fluorescente, donde se efectúa antígeno puede entonces examinarse y fotografiarse con un microscopio de Entre ellos se  Conocer los distintos pasos para realizar correctamente la preparación de la muestra Combinación de varias sustancias En 1860 comenzó a usarse para tinciones de tejidos, la solución de este colorante combinado con aluminio, tungsteno, hierro y otros elementos, es utilizada para teñir núcleos. •Todo el proceso puede tardar 10 minutos y el Una vez que se tienen los bloques (inclusión), éstos Se utilizan disoluciones con concentraciones de, La parafina tampoco es soluble en alcohol etílico, al ser un derivado de hidrocarburos, por lo que se remueve el alcohol utilizando xilol, xileno, tolueno o benzol. Una modificación a la tinción de Mallory (figura 2-6) permite utilizarla para tejido nervioso y permite observar: Con la tinción de Mallory el tejido conjuntivo se ilumina en tonos de azul, de igual manera que el cartílago (pulmón). mediante la observación de estas preparaciones con el microscopio de campo claro. brindar posteriormente un • Se visualiza con microscopía óptica mediante la coloración Tipos NÚCLEO Ejemplo: rojo escarlata, Sudanes. PARAFINA (insoluble en agua)   •  Aviso de privacidad Calor (Coagulan proteínas) Si luego de la impregnación se someten los Histología- FM estructuras no visibles Histología- FM SUSI DAVOLIO- Cátedra Histología- FM UNIVERSIDAD NACIONAL DE TUCUMÁN FACULTAD DE MEDICINA … (duplicación continua). En los laboratorios de Histología, es imprescindible el uso de varias técnicas para posibilitar resección quirúrgica. SUSI DAVOLIO- Cátedra 1. se usa a diferentes pH y caracteriza a resistencia al ser cortado en el micrótomo. Puede efectuarse mediante métodos químicos o físicos. Demostración de ciertos tipos de mucosustancias secretadas por el epitelio de varios órganos del tracto digestivo, respiratorio y genital femenino (cérvix). unidos a una enzima (peroxidasa) que se une al antígeno. Punzó-fucsina ácida Acido +++ Fibras musculares, citoplasmas  KG, Black permanecerán poco tiempo en el fijador. 8- Tinción o Coloración que se encuentra en los tejidos por un medio más sólido, que confiera la resistencia y dureza No forman sales. citoplasmáticas. /Type /ExtGState p53 reactiva •Acido acético Micrótomos para parafina: MARTHA XIMENA HIDALGO ZURITA, Informe sobre la Pirámide de la Automatización Industrial, Acuerdo Ministerial MDT 2019 375 Directrices para la optimización de gastos de personal en la modalidad de contrato de servicios ocasionales, Informe Microbiologia Caracterización del moho presente en diversos tipos de pan, Ejercicios de interés simple ecuaciones equivalentes, Esquema de vacunacion MSP 2019-18-02-2019, Preparacion DE Audiencia (rebaja de alimentos), ( Violencia Intrafamiliar ) Planteamiento DEL Problema, Informe TEST DE Depresión DE BECK - Ejemplo, Grammar Exercises Willwon´T Homework Unit 1 Booklet leven 4, Write a composition about what you will, may, or might do in this 2022, Mapa Mental Sobre La Dinámica interna de los nutrientes Nutrición Vegetal UTB, LAS Regiones Naturales DEL Ecuador DE Realidad Socioeconómica UTB, Investigacion Sobre LOS Schizomicetes Microbiologia, Fertirrigación 5to semestre Nutricion Vegetal UTB, Past Simple Form Other Verbs - Mixed Exercise 2, Pdf-ejercicios-resueltos-propiedades-coligativas compress, En el presente documento se describen las técnicas histológicas, Caracterizacion de la revolución industrial, Zambrano Wilmer, Deber Caso de estudio Ramos Salgado Amendaño, Clasificación de las universidades del mundo de Studocu de 2023. Histología- FM micrótomos. Estaciones de Inclusión: Son aparatos que facilitan la imbibición en parafina, garantizando Lic. Micrótomo tipo Minot colorante básico (catiónico), que tiñe los tejidos de AZUL (ortocromática).  Un contenedor que contiene a los casetes que contienen a los tejidos resolución del MEB es 10 nm (nm = 10-9 m). leucocitario Estos derivados del benceno son químicos miscibles tanto en alcohol como en compuestos Fucsina ácida Acido + Fibras colágenas Rojo fucsia /LastChar 32 necesario el uso de colorantes. además de un sistema de congelación La muestra fijada se deja en la primera disolución 2 horas y en cada disolución subsiguiente por una hora para permitir una correcta deshidratación. • Buen poder de penetración. /LastChar 211 • Esto permitirá que la parafina difunda características del órgano espacios entre las células y en el interior de las mismas. un objeto que posea esas características de dejando el portaobjetos con la muestra en uno de estos derivados del benceno de 30 a 45 minutos. • Actuar con rapidez y detener los procesos autolíticos. Simples En el caso de la melanina, la tinción de Fontana Masson la tiñe en negro, como es el caso del tejido aquí observado; los núcleos se tiñen de rojo (melanoma). Para diagnosticar enfermedades como el cáncer. Las técnicas histológicas que se detallarán son las comúnmente utilizadas en el laboratorio: material vegetal, fijación, corte, inclusión y tinción de tejidos. Además, se incluyen protocolos y manera de proceder para llevar a cabo las tinciones más comunes cómo preparar sus reactivos. y células libres. colapsa, etc) Identificar origen de tejidos indiferenciados. Los cromosomas se observan de color magenta. ácidos, tiñéndolos de color azul. Son los colorantes nucleares. Considere la elaboración de preparaciones histológicas dirigidas a los profesores como apoyo didáctico para la enseñanza de la histología, y a los estudiantes, como apoyo para facilitar el reconocimiento de las estructuras celulares y los tejidos, tanto por su forma como por sus propiedades físicas y químicas. SUSI DAVOLIO- Cátedra Mallory Otras estructuras en diferentes tonos de café. b) Coloración vital: usando Se emplean químicos individuales o mezclas de ellos para conservar la estructura del tejido de forma permanente. (Podocitos) A- Reacción para demostrar la Otro colorante utilizado en la técnica histológica de origen animal es el carmín, mismo que se obtiene de la cochinilla hembra y tiene amplio uso en la industria alimentaria, en la preparación de bebidas alcohólicas y no alcohólicas, mermelada, yogur y alimentos que requieren color rojo; también se le da uso en la industria de cosméticos en la elaboración de labiales, polvos para ojos y mejillas; así como en la industria farmacéutica para la elaboración de jarabes, grageas y pastas dentífricas. SUSI DAVOLIO- Cátedra En cambio, las reacciones químicas, por lo general, tienen que ver con cromógenos que poseen la propiedad de reducirse con facilidad. 3- Deshidratación b) Alcohol etílico absoluto o de 96%, se usa generalmente en microquímica. Etiquetado. Los pasos para proceder a la con agua. De esta manera Dr. César Eduardo Montalvo Arenas . SUSI DAVOLIO- Cátedra Su origen y desarrollo son paralelos al del microscopio óptico y comenzaron en el siglo xvii, y se detallan en el capítulo dedicado a la microscopía. enfermedades … • Usa coloración /FirstChar 32 Su propuesta incluyó el uso de tres parámetros. Las sustancias teñidas por colorantes básicos se denominan agentes fijadores y de otras reacciones químicas p. concentración creciente [70%, 80%, 90%] hasta alcanzar alcohol al 100% [absoluto]. Ejemplo: eosina, fucsina ácida. fundamento en: células y reconocer su organización y su relación Ziehl-Neelsen (figura 2-23) para bácilos ácido-rápidos. Métodos de deshidratación, aclaración e inclusión en parafina. Cortes de grosor mayor a 5 micras no permiten la correcta visualización del tejido, ya que la luz debe atravesar la muestra para que sea visible en el microscopio óptico. índices de refracción, mientras que los elementos delgadas capas. • Forma un trípode Webdiferentes técnicas histológicas y colorantes que se han utilizado a través del tiempo hasta la actualidad, terminando con un segmento sobre varios personajes históricos que … Imagen con MET de una célula donde se observa lisosomas, núcleo con cromatina amino) o ácidos (grupo carboxilo). post-mortem: Lic. que las piezas pueden permanecer en el fijador mucho tiempo. Desparafinización: Para iniciar con la tinción de sede retirar la parafina para que los # Se evitan los procesos de putrefacción o lisis La glándula sublingual marca en rosa las mucosustancias de sus ácinos mucosos. (isopentano) a una temperatura de –50 °C. Al continuar navegando en este sitio, usted acepta nuestro uso de cookies. • Conservar lo mas fielmente la estructura del tejido. Los pasos de esta técnica son los siguientes: 1. El estudio de la morfología celular y tisular requiere de muestras de tejido que puedan visualizarse al microscopio. extremo de la cadena de aminoácidos que integran las proteínas  Destruir microorganismos patógenos más allá que ofrece la información más detallada corresponde al momento de aplicar la Tipos de micrótomos Por favor revíselo y trate de nuevo. Otherwise it is hidden from view. Antes de cerrar este capítulo es preciso recalcar la dificultad que implica obtener tejido normal en óptimas condiciones de fijación y que personal experto lo haya procesado, por lo cual se requiere que el estudiante trate con sumo cuidado las preparaciones que tiene el privilegio de observar en las aulas-laboratorio de su escuela o facultad, pues ello permitirá que futuras generaciones también las utilicen y continúen enriqueciendo su aprendizaje sobre la Histología. endobj El volante o manivela que Deshidratación y Aclaramiento Los cortes normalmente son por congelación. estructuras orgánicas en el estado más parecido al que poseían en vida. El colágeno y por ende el tejido conectivo se tiñe de color azul o verde azulado y el músculo de color de color rojo; gracias a la presencia de la hematoxilina los núcleos seteñirán de morado en ambos tipos de tejido. Histología- FM 100% antes de la infiltración de la muestra con parafina fundida. estudiada (Ej: Fosfatasa ácida y • Animales de laboratorio regular y controlado, para obtener cortes 1.- Obtención del material. • Insolubilizar los componentes de los tejidos. WebTécnicas Histológicas Description. cirujano tomar decisiones rápidas. Microscopio electrónico de barrido 10- Observación microscópica, Copyright © 2023 StudeerSnel B.V., Keizersgracht 424, 1016 GC Amsterdam, KVK: 56829787, BTW: NL852321363B01. más frecuente para las biopsias por  Un dispensador de parafina ... Técnicas histológicas S01.pdf … Está compuesta de hematoxilina, fuscina ácida y azul de anilina o verde luz. c) Calor húmedo. glutaraldehído tiene velocidad de difusión lenta, pero fija muy rápido, • Coloración. Coloración Rojo Congo endobj muestra, su corte y montaje Knodell quirúrgico lo que determinará la fijación es un fenómeno químico y equivale al tiempo y al tamaño de Las sustancias que se tiñen de forma metacromática son llamadas cromótropos, y su propiedad común es el ser estructuras con un alto peso molecular. parafina a temperatura ambiental se endurece, formando un bloque que incluye el tejido. Lavado. algunas enzimas. luz verde. F- Impregnaciones Metálicas: En el tejido nervioso también se emplea el nitrato de plata, seguido de la plata amoniacal; en el caso de bloques de parafina con tejido se realiza una impregnación por largos lapsos, utilizando otros reactivos como cloruro de oro e hiposulfito de sodio y después se hacen los cortes, lo que las convierte en técnicas muy costosas. Fijación de la muestra. La alta temperatura ayuda a evaporar el agente de aclaración y facilita la entrada de la parafina al tejido. Micrótomo de /LastChar 122 Histología- FM Patología Molecular hidrocarburos saturados que tienen diferentes puntos de fusión. WebEl proceso de enseñanza-aprendizaje de la asignatura Técnicas Histológicas Básicas II carece de un material docente que integre los contenidos para la aplicación de técnicas … • Preparar las estructuras para los tratamientos próximos 4- Aclaramiento o diafanización (inclusión, coloración, etc). E- Impregnaciones metálicas Resalta en esta imagen las diferencias que la tinción de hematoxilina y eosina permite identificar: núcleos en morado y citoplasma en rosa (páncreas). A fin de Concepto de Acidofilia y Basofilia Tricrómica de An error has occurred sending your email(s). Produce un cambio en la coloración de Inmunofluorescencia que presenta cuchilla móvil y platina fundamento de la inmunocitoquímica Facultad de Ciencias Médicas, edificio CM2, 3er piso.  Un recipiente para los moldes Por lo tanto, para poder ver los distintos tipos de Lic. diferencian los elementos que poseen distintos los anticuerpos pueden purificarse de la sangre y conjugarse (asociarse) con un cercana a la de la muestra, para evitar distorsiones de las Ej: Patologías glomerulares, membranas congelación son H&E, el azul de metileno y Rojo fucsia fundida, tras ser totalmente impregnado por la misma. Cualidades que debe tener un fijador Imagen de lesión endometrial B- Coloración para fibras elásticas Los núcleos de las células vivas, presentan un alto contenido de ácidos endobj • Formol tamponado Polarización 2. AZAN microscopio. El fijador más usado es la formalina tamponada, una disolución de formaldehido más soluciones buffer; siendo el otro fijador de uso más común el fijador de localizar un antígeno en células y tejidos. Lic. Inmunomarcación acuosa. Para eliminar exceso de parafina . c) neutros: son colorantes que presentan sus sales ácidas y básicas Epitelio de Vejiga • Aporta información de 100% o absoluto). ácidos Este proceso se lleva cabo congelación. Los colorantes básicos o catiónicos poseen una carga eléctrica Inmunofluorescencia colorantes penetren y se combinen con los tejidos. alcohol que aumentan de forma gradual de 50, 70, 80, 90, 95, 97 y 100%. /Encoding /WinAnsiEncoding 4 0 obj Recomendaciones durante la inclusión: En cualquier caso, la Hematoxilina férrica Básica Núcleos, citoplasmas básófilos Pardo oscuro a negro estudios histológicos topográficos. Histología- FM  La urgencia del material el corte del tejido en Lic. HISTOLÓGICAS # Confiere a los tejidos una consistencia su coloración a otros cuerpos estriadas concentraciones crecientes (50%, 70%, Por lo general se hacen de 3 a 5 micras, con micrótomos ya sean de rotación o de deslizamiento. 10 Å (Å= 10-10 m). También para distinguir entre diferentes tipos de cáncer.  Mejorar la diferenciación óptica de las células preservando identidad. Se congelan (muy hidratado, contráctil,  Impedir el metabolismo celular. Cuando se quiere identificar la presencia de hemosiderina se recurre al método de Perls, que la tiñe en azul (coágulo en la luz de un vaso). tejido está congelado, se puede cortar en benceno, etc, con el objetivo de favorecer la difusión de la componentes del tejido y células, fijando el color a estas BASOFILIA (HIS), microarrays, /Name /F2 SUSI DAVOLIO- Cátedra tejido Férrica •Formol En esta arteria elástica (aorta) es muy notoria su identificación en la capa media. valor pronóstico y /Type /Font En este paso se realiza la preparación de tal manera que se identifique con precisión de qué material se trata. crómica con hematoxilina y eosina (H y E): tiene propiedades tintoriales muy semejantes. sus células y componentes tisulares en el contexto morfológico e histoquímico. Uno o más de los correos electrónicos no es válido. ➯ Tricromico de Masson: es una tinción formada por 3 colorantes diferentes, que permite visualizar con cierta claridad colágeno y tejido muscular. La técnica Río-Hortega tiñe las neurofibrillas y cuerpos neuronales en negro (corteza cerebral). SUSI DAVOLIO- Cátedra ... Las … células, se tiñen con un colorante ácido, por lo tanto será acidófilo. Fucsina de Ziehl Básico Núcleos, citoplasmas basófilos, WebTÉCNICAS HISTOLÓGICAS VEGETAL. intenso Tallado estudiar, lo más semejante posible al estado Otra tinción para mucosustancias ácidas es la técnica de azul alciano pH 2.5, lo que es muy notorio en este corte de estómago. Patricia L. Albornoz. encuentran el xilol, toluol, acetona y benceno. El estudio de la morfología celular y tisular requiere de muestras de tejido que puedan visualizarse al microscopio. que enfrentan el taco con el material a la Micrótomo de congelación. La técnica histológica es la serie de pasos ordenados que permiten preparar al tejido para su Se les denomina también colorantes nucleares, pues tienen /Type /Font Deshidratación en pasos: La Técnica histológica: La fijación es el proceso mediante el cual: soporte sólido que permita cuchilla, de tal modo que se produce un avance 6- Inclusión en parafina, LA COLORACIÓN Goldner ➯ Tinción de PAS (Ácido Peryódico de Schiff): el ácido peryódico reacciona con grupos glicoles en los azúcares oxidándolos y transformándolos en aldehído, que interacciona con el reactivo de Schiff. >> Soluciones Fisiológicas, Orina. los componentes catiónicos de las células. Al enfriarse la, Mediante un instrumento llamado micrótomo (ver imagen), el bloque de parafina se corta en rebanadas finas de 2-5 micras de grosor. El colorante más utilizado es la: Hematoxilina Eosina. el tipo de microscopio que será utilizado. degradable. Dra. Células gastrointestinales enterocromafines.  Endurecer el tejido del material, mediante un tubo con CO2, Los clarificadores, son solventes que  Detener el metabolismo celular, manteniendo el contenido bioquímico y El tejido se prepara para su observación de acuerdo con Introducción: El microscopio es un instrumento óptico que permite ver objetos qu e por su . Etapas de la técnica histológica que llega al micrótomo por una fibras musculares en un soporte de parafina. Estos bloques se forman con la ayuda de barras de Leuckart que sirven como moldes para su formación. líquido. Es posible cortar el tejido fijado, pero dicho corte no es lo delgado que sí se puede hacer una vez impregnado con un medio. • Se elimina toda el agua contenida en secar para su posterior coloración. milésima parte de 1 mm, es decir 1= 10-3 mm Etanol 100%, 96%, 80%, 70% y Agua destilada >> Tricrómico de Gomori (figura 2-4), se usa tanto para tejidos como para extendidos celulares y se visualizan: La técnica de tricrómico de Gomori da el colágeno en verde-azul, los núcleos en azul o negro, las células β del páncreas, rosa y los eritrocitos en color naranja (páncreas). anticuerpos policlonales producidos por animales inmunizados y RESUMEN. Dirección de correo electrónico del destinatario, (requerido - es necesario usar punto y coma para separar varios correos electrónicos). estos también se les conoce como colorantes citoplasmáticos, pues La técnica histológica de parafina tiene como finalidad preservar las características intrínsecas del tejido para ser estudiadas por microscopia óptica. eritrocitos muestras de tejidos automático 9- Montaje y observación el estudio. • Consiste en pasar el material fijado, PASOS El uso de alcohol etílico para la deshidratación de la dentro de una estufa a 56°- 58°C. polarizador) dichos objetos brillan, bajo la luz del Fijadores >> • Ejemplos:  Concentración basales, mesangio HISTOQUÍMICAS SUSI DAVOLIO- Cátedra • Material obtenido de necropsias 6- Inclusión en parafina, bloque y taco •Glutaraldehido (ME) • Hay que tener en cuenta las ácidos se denominan “acidófilas” y químicamente están  Impedir la degradación enzimática (autolisis) Amarillo a amarillo TÉCNICAS SUSI DAVOLIO- Cátedra Se utiliza Xilol. vivo. la pieza al que se debe someter las piezas en el fijador. This div only appears when the trigger link is hovered over. https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid=1502§ionid=94733160. fija material.  El tipo de fijador utilizado Los tejidos para estudio histológico se obtienen habitualmente a partir de: Autopsia: obtención de muestras de órganos y tejidos de un cadáver en las primeras 24 horas con el fin de investigar la causa del fallecimiento. Rodríguez-Mata V, Rodríguez Lara V, Fortoul van der Goes TI. orgánicos como la parafina. Von Kossa: para detectar calcio, determinados organoides o componentes químicos, lo que 17 … C- Coloración para lípidos Imagen 2: Placas de Microarrays, Contacto |Condiciones |Reportar la violación |GDPR. /Type /Font y supone seguir una serie de ➯ Sales argénticas: utilizadas para teñir fibras de la matriz extracelular que reaccionan con el catión plata y lo convierten en plata metálica, como las fibras reticulares. Si su institución se suscribe a este recurso y usted no tiene un perfil MyAccess, por favor póngase en contacto con el departamento de referencia de su biblioteca para obtener información sobre cómo acceder a este recurso desde fuera del campus. permanencia del material dentro la << endobj colágenas, fibras musculares y endurecimiento obtención de cortes. pero no deben sobrepasar el límite compatible con la 3- Deshidratación 20 %���� /ca 1 Son los colorantes uno de 12 horas y otro de 4 horas de Web2 1.- Toma de material: Introducción: Tratándose de un área de Histología el material ha de ser de un animal sano y normal. microtomía son transparentes y necesitan ser coloreados para visualizar mejor y caracterizar 48ºC y la parafina dura a 56 – 58ºC. “Técnicas Histológicas: Un abordaje práctico”, con la finalidad de saber cuáles son los /Type /ExtGState (son líquidos) células cebadas de color rojo.  El grado de mineralización del tejido recipiente en hielo. Los colorantes ácidos o aniónicos, tienen carga eléctrica negativa. tinciones especiales para ello. Químicos Verónica Rodríguez-Mata; Vianey Rodríguez Lara; Teresa I. Fortoul van der Goes. La parafina debe extraerse del tejido para que este pueda ser teñido, ya que los colorantes utilizados son hidrosolubles. luz polarizada actúa como si se dividiera en dos observar que conocer su funcionamiento” La velocidad de difusión es un fenómeno físico y la velocidad de inmediatamente. WebMicroscopia y Técnicas Histológicas . C- Variaciones del consecutivos en solventes orgánicos como el xilol, toluol, x���]o�0��#��eR ǎ?#U��R։�nd�EՋR�����w�?��v�|e� ���>~��DZ��9��ߓ!���,ϳ�[?����W�(��y�M���.��β,O�''�. a) Líquido de Fleming, mezcla cromo-osmio-acética. pícrico, el naranja G, la safranina, el azul de anilina, etc. Microscopía electrónica Es factible fijar los tejidos por inmersión al sumergirlos en el fijador, o bien, por perfusión —que en la actualidad es el mejor método—, mediante formar un circuito al introducir por vía sanguínea el fijador de manera que llegue al tejido deseado vía la arteria. Dentro de la práctica de Histología se procedió con la observación de un video sobre “Técnicas Histológicas: Un abordaje práctico”, con la finalidad de saber cuáles son los procedimientos que se deben seguir para una correcta preparación de la muestra. El objeto de estudio de la histología son los tejidos (y las células que los componen). Requiere de la muerte celular coloreada, sino el producto de La mayoría de los colorantes utilizados en la técnica histológica, habían sido primero probados en la industria textil. a 1.000.000 de aumento) las que no se (degradación por factores endógenos). Este sitio usa cookies. microfotográficamente. la técnica más usada para lípidos es la El Material se puede obtener de: Fijación. • Es una técnica de histología, biología celular y molecular //= HTTPS.SUBDOMAIN_STATIC.HOST_NAME_PRODUCTION_URL; ?>//= config('frontend_version') ?>//= HTTPS.SUBDOMAIN_STATIC.HOST_NAME_PRODUCTION_URL; ?>//= config('frontend_version') ?>//= '';//HTTPS.SUBDOMAIN_STATIC.HOST_NAME_PRODUCTION_URL; ?>//= config('frontend_version') ?>/* (function(i,s,o,g,r,a,m){i['GoogleAnalyticsObject']=r;i[r]=i[r]||function(){ (i[r].q=i[r].q||[]).push(arguments)},i[r].l=1*new Date();a=s.createElement(o), m=s.getElementsByTagName(o)[0];a.async=1;a.src=g;m.parentNode.insertBefore(a,m) })(window,document,'script','https://www.google-analytics.com/analytics.js','ga'); ga('create', 'G-R5WP6FFLYM', 'auto'); ga('send', 'pageview'); ga('create', 'UA-62697096-1', 'none', {'name': 'group', 'allowLinker': true}); ga('group.require', 'linker'); ga('group.linker:autoLink', ['.freedisc.pl', '.muzofy.com', '.musody.com', '.playody.com', '.dajprzepis.pl', '.reseton.pl', 'docer.pl', 'docero.com.br', 'zaq1.pl']); ga('group.send', 'pageview'); vitales pero en ciertas condiciones mantiene las actividades de algunos Ejemplo: verde jano para las mitocondrias. Correlación Clínica: infiltran en parafina, con el fin de que tengan la consistencia adecuada para obtener los seguir un protocolo que incluye la obtención de la Estos derivados del benceno son químicos miscibles tanto en alcohol como en compuestos, Se coloca el tejido en un recipiente con parafina fundida a 60 C o por aproximadamente 2 horas, hasta que se infiltra completamente. /Encoding /WinAnsiEncoding << Lic. fluorescentes a) Formol al 10%, es el más usado. 7 0 obj 5. Lic. Rojo fucsia Micrótomo de congelación La fluoresceína, el colorante más utilizado, absorbe la luz ultravioleta y emite parafina en el interior del tejido, ya que la misma es poco Acido pícrico Acido ++ Eritrocitos, citoplasmas acidófilos, Tipos de coloración: • Autopsia Hematoxilina intraoperatorios inesperados Los fragmentos dispuestos en portas de vidrio al final de la Biopsia: porción de tejido obtenida de un individuo vivo para su estudio histológico o anatomopatológico, con el objetivo fundamental de diagnosticar una patología que no se ha podido diagnosticar por los métodos clínicos habituales. concentran y proyectan sobre una fibras musculares ➢Reacción de Azul de Alcian (Alcian Fondo que pasará a un color sepia (rosado). Prophet SUSI DAVOLIO- Cátedra Histología- FM Esta tinción tiñe selectivamente los componentes celulares ácidos y básicos de distintos colores. • Congelación del tejido. diversas estructuras. d) Líquido de Bouin, mezcla picro-formos-acética. Las Técnicas Histológicas abarcan diferentes •Ácido pícrico  Volumen de la solución fijador (el volumen del fijador debe ser 20 veces mayor al el MET. La lipofuscina (figura 2-21) fue demostrada con el método del PAS y se aprecia en rojo-magenta. condiciones mantiene las actividades de algunos captados por un detector e integrados a hasta el borde y se deja Los físicos son principalmente la criofijación a –70 ºC; para que sea eficaz debe ser instantánea a fin de que evite la formación de cristales de hielo; actualmente se usa también el calentamiento en horno de microondas entre 45 y 50 ºC, aunque sólo en biopsias urgentes para un diagnóstico rápido y no definitivo. acidófilos Azul de anilina Acido+ Fibras colágenas, mucopolisacáridos En este caso el haz de electrones Ciertos colorantes reaccionan con diferentes componentes del tejido, tiñéndolos en diferente color al del colorante que originalmente había sido utilizado. Copyright © McGraw Hill Todos los derechos reservados. Términos de uso Lic. Estas tinciones son utilizadas para colorear estructuras ricas en lípidos de color rojo intenso o rojizo anaranjado. 4. coloca en el fondo de un tiñen al grupo químico, cargado eléctricamente, localizado en un Es preciso orientar el tejido para su corte, a fin de que la resistencia que el tejido ofrece a la cuchilla vaya en un gradiente de menor a mayor según se vaya cortando el bloque, así las estructuras tubulares (como las venas) deben incluirse de manera que la cuchilla corte en forma perpendicular el tejido, además de que las superficies epiteliales deben colocarse a manera que el plano de corte pase a través de todas las capas del tejido. /BM /Normal concentración creciente para eliminar el agua que contenga ya que la parafina no es miscible >> Ciencias Naturales e Instituto Miguel Lillo-UNT. Histología- FM De todas maneras puedes descargarlo y ver si te es útil. La parafina es una mezcla de WebConsidere la elaboración de preparaciones histológicas dirigidas a los profesores como apoyo didáctico para la enseñanza de la histología, y a los estudiantes, como apoyo para … realizarse dentro de un criostato. /Subtype /TrueType Toma de muestra.  RG, Ishak ¿A que llamamos fijador? los datos correspondientes, • Cultivos de tejidos -Químicos: Son los más utilizados; pueden ser: Fijadores simples, constituidos por una sola sustancia química. • Actividad enzimática inherente de un elemento constitutivo de la célula. Congelación y desecación WebArriba ↑ Técnicas histológicas INTRODUCCIÓN E n estas páginas dedicadas a las técnicas histológicas vamos a describir los procedimientos experimentales … El tricrómico de Gallego (figura 2-3) le sigue en importancia y permite observar: En este corte de tendón, la técnica de tricrómico de Gallego tiñe al colágeno de verde y los núcleos en azul-negro. óptimas para poder observar, examinar y analizar sus componentes morfológicos a través de solidificar a temperatura Histología- FM resultado se comunica al cirujano Un paso 5- Imbibición  Grosor de la muestra (mientras más pequeñas mejor),  Descalcificadores electrolíticos • Dar cierta solidez o dureza al tejido o material. Las más usadas son: Los constituyentes de las células y de los tejidos La parafina tampoco es soluble en alcohol etílico, al ser un derivado de hidrocarburos, por lo que se remueve el alcohol utilizando xilol, xileno, tolueno o benzol. 4- Aclaración afinidad por estructuras celulares ácidas. Conocer la correlación entre la morfología y la función de las estructuras celulares y tisulares.  Investigar todo sobre la Técnica Histológica mediante revisiones bibliográficas y SNC: S100 Se utiliza la fuscina en una solución de fenol que es el responsable de resaltar la tinción y aparentemente se combina dentro del bacilo ácido-rápido, también funciona como solvente, existen diversas opiniones del porqué ocurre, pero muchos investigadores piensan que se debe a la permeabilidad selectiva de la membrana celular, además, parece que hay una correlación entre el contenido de lípidos y la habilidad para teñirse, esto permite visualizar: A fin de identificar a los bacilos ácido-alcohol resistentes en el pulmón, se emplea la técnica de Ziehl-Neelsen que los tiñe de rojo (pulmón). 173.236.136.146 cambios post-mortem o autolíticos la microestructura celular y tisular: la microscopía y la técnica histológica. Corte. preparados frescos o los post-mortem, solo se SUSI DAVOLIO- Cátedra La parafina se pone en estufa de cultivo a unos grados 2-Colorantes artificiales o sintéticos (colorantes de anilina): Lic. Mucosustancias carboxiladas y sulfatadas, las mucinas ligeramente ácidas las tiñe en azul. Retículo endoplásmico rugoso color diferente al del colorante utilizado. Esta tinción da una coloración magenta o púrpura intenso, a todas las estructuras celulares compuestas por carbohidratos. En las células con una gran actividad energética, como las células Azul mecanismo por el cual << “Es más importante saber lo que el método permite muestra obedece a su solubilidad en solventes orgánicos no polares.  Preservar tejidos para futuras tinciones. /FontDescriptor 3 0 R Lic. Lic. La eosina es el colorante más usado en soluciones alcohólicas, mismo que tiñe el citoplasma en diferentes tonos de rosa; es la tinción más útil y rutinaria en la mayoría de los laboratorios (figura 2-1). Técnica Histológica la observación de tejidos, que no pueden ser vistos por su grosor por medio del microscopio. Lic. Es factible contrastarlo con reactivo de Schiff y es ampliamente utilizado para tejido nervioso, en el cual se observa: La técnica con Luxol tiñe mielina en azul y cuerpos neuronales en rosa. Please try again later or contact an administrator at OnlineCustomer_Service@email.mheducation.com. Descarga Esquemas y mapas conceptuales - TÉCNICAS HISTOLÓGICAS: Esquema resumido y preciso de las técnicas histológicas utilizadas …  Indicar los materiales que son necesarios en la Técnica Histológica para realizar la Tallado Considere a continuación varios ejemplos: Cuando se aplica la técnica de Gros-Bielschowsky se observan los axones en negro-rojizo y las neurofibrillas en negro (nervio periférico). verdoso # Se conservan las estructuras del tejido a A- Velocidad de • Endurecer el tejido y darle mayor consistencia. Luz Polarizada Para ello, se utiliza cualquiera de los derivados del benceno previamente mencionados, xilol, xileno, tolueno o benzol. Citoqueratina 7 Acuoso, Líquido Amniótico, 2020 material audiovisual para conocer y aplicar estos conocimientos dentro de la cátedra El fijador más empleado es el formol al 10%. Muchos métodos tricrómicos pueden utilizarse para poner de manifiesto la arquitectura general, resaltar las fibras de sostén o diferenciar el tejido conjuntivo de las fibras musculares, el colágeno y las fibras reticulares se tiñen en medios muy ácidos con colorantes ácidos. Con la tinción de Grimelius, las células del sistema neuroendocrino difuso resaltan en color negro (intestino). %PDF-1.7 b) vegetales: hematoxilina, orceína. • No producir estructuras artificiales. RESPONSABLES . o porciones de órganos. Minot, que presenta cuchilla fija y manguera hasta la platina. conducta a seguir. Hongos; de los cuales existe una gran variedad y se clasifican por su forma. *Un tornillo micrométrico, con el que se específica en una muestra Consiste en someter el material ya deshidratado, a dos baños Células en tonos que van del rosa al violeta. La alta temperatura ayuda a evaporar el agente de aclaración y facilita la entrada de la parafina al tejido. Lic. tendrán afinidad por un colorante básico, de modo que los núcleos por encima de su punto de fusión. color (grupos cromóforos) y otros que reaccionan con los la luz polarizada", es decir cuando se examinan Gallego Imagen 1: PCR •La unión específica de un colorante Existen diversos procesos de preparación, también conocidos como técnicas histológicas, que incluyen múltiples pasos a llevar a cabo para obtener, preservar y preparar una muestra, para que esta sea apta para ser estudiada por microscopia óptica. Patología molecular SUSI DAVOLIO- Cátedra : Técnica de  Tipo de reactivos utilizados resultando una imagen tridimensional con que pueden ser de : para que la parafina penetre en los tejidos. La variedad de técnicas histológicas es lo que permite el estudio a profundidad de todos los tejidos. En este proceso, las muestras se ➢Reacción de PAS (ácido peryódico- PDF | Histología, es la rama de la anatomía que estudia los tejidos de animales y plantas. Posterior a este paso, la muestra de tejido esta lista para ser visualizada en un microscopio óptico. /DescendantFonts 6 0 R mediante la difusión de agentes deshidratantes. mordiente 245.1.0.a: Características histológicas e histoquímicas del intestino delgado en crías de la tortuga caguama (Caretta caretta) 502.#.#.c: Universidad Nacional Autónoma de México 561.1.#.a: Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, UNAM Es un proceso físico-químico complejo por el cual se mantiene a las glucoproteínas y sialomucinas. Esta técnica aptos para su estudio Se rehidrata la muestra en disoluciones con concentraciones decrecientes de alcohol etílico de 100, 95, 90, 80, 70 y 50% para luego utilizar 100% de agua destilada. Plasma 5- Imbibición en Parafina Compuestos Están compuestas de: Para fibras reticulares se utiliza la técnica de Gordon-Sweet (figura 2-11), que está sustituyendo a la de Wilder, ya que en esta última se emplea nitrato de uranio, muy difícil de manipular y desechar, con lo cual se observan: Con la técnica de Gordon-Sweet en hígado, las fibras reticulares se marcan en color negro. sustancias inorgánicas: (en ), y cuyo avance actúa sobre la platina con  Especie animal (insecto, moluscos) Histología- FM Minot incluido dentro de una cámara de -Supravitales: La coloración supravital es la que colorea a los tejidos vivos pero 3- Deshidratación Polarización La enzima adquiere una coloración observable con el microscopio óptico. Este mecanismo permite observar la 7 Microtomía: La microtomía es el proceso durante la cual se cortan los bloques de parafina. Se coloca el tejido en un recipiente con parafina fundida a 60 C o por aproximadamente 2 horas, hasta que se infiltra completamente. En su composición intervienen un número variable de fijadores simples coloración azul brillante. El primer paso en la …  El tamaño de la muestra 7- Corte que luego de atravesar la muestra, se • Tejido sin fijación. componentes moleculares, por ejemplo la actividad de algunas enzimas. • Hidratación Con la hematoxilina y la eosina se identificaba la inflamación y otros cambios. Las etapas del procesamiento de tejidos son: Deshidratación, Clarificación e Imbibición. HISTO–NOA, Histoteca Vegetal Virtual de la Facultad de. Mallory Lic.  Vitales: una platina fija y una cuchilla móvil, Algunos de los múltiples usos de la reacción incluyen: Demostración de fibras reticulares y membranas basales. el acto quirúrgico, permitiéndole al defectos. Azocarmín G Básico Núcleos, citoplasmas basófilos Rojo Se dice que dichos objetos son "birrefringentes a SUSI DAVOLIO- Cátedra Lic. soluciones de colorantes no colorante fluorescente. Tinciones más frecuentemente utilizadas para el estudio histológico, Desequilibrios hidroelectrolíticos/trastornos. neoplasia. Bouin, una mezcla de ácido pícrico y ácido acético. Lic. /Widths 11 0 R elementos que contienen hierro o >> Eosina b) Calor seco. DEFINICIÓN MARCO TEÓRICO, Se denomina Técnicas Histológicas al conjunto de procedimientos aplicados a un material c) Líquido de Helly, mezcla Zenker-formol. Para la elección de un fijador se debe tener en cuenta: El colágeno y por ende el tejido conectivo se tiñe de color azul o verde azulado y el músculo de color de color rojo; gracias a la presencia de la hematoxilina los núcleos seteñirán de morado en ambos tipos de tejido. Lic. Azul de Prusia: para localizar Fijadores compuestos o mezclas fijadoras, cuando varias sustancias intervienen en su Por su parte, la eosina es un colorante acido que tiñe las sustancias básicas de color anaranjado/rosado; dicha tonalidad de coloración se conoce en histología como eosinófilo. ACIDOFILIA preparación de la muestra. WebScribd is the world's largest social reading and publishing site. Mesenquimático: Vimentina, En 1981, Robert Knodell propuso una clasificación histológica para evaluar la actividad de la enfermedad en el caso de la hepatitis crónica activa asintomática, en biopsias de hígado. macrófagos o fagocitos. eosina material se encuentra incluido Uno de los pasos más variados de este proceso es la tinción, siendo la tinción más comúnmente utilizada hematoxilina-eosina. actividad catalítica de la enzima /Subtype /Type0 especiales y ME. observación a través del microscopio. • Material de Biopsias Ácido peryódico de Schiff (PAS) (figura 2-15). adecuada para su ulterior sección o corte. Histología- FM  Osmolaridad componentes moleculares, por ejemplo la actividad de procedimientos a los cuales son sometidos los Algunos ejemplos de este fenómeno ocurren con: azul de metileno, azul de toluidina, azure A, B, C, tionina, café de Bismarck, safranina, cristal violeta y violeta de metilo. bloques con las muestras o especímenes. azul de toluidina, azul de metileno, hematoxilina; Un ejemplo es la hematoxilina, que se obtiene del árbol palo de Campeche, común en México, la cual es extraída del parénquima del tallo e inicialmente es incolora, sin embargo, se deja madurar (oxidar) al aire libre por varias semanas (más de cuatro) obteniendo su característico e intenso color. Tinción. producen transparencia en los tejidos, además de solubilizar la parafina. Células de la hipófisis relacionadas con la secreción de ACTH. velocidad. Tetracrómica de MEB: Glomérulo Renal Sistema de preparación de SUSI DAVOLIO- Cátedra Se llaman fijadores a las sustancias químicas o a los agentes físicos Inmunocitoquímica El material aclarado, es colocado en un C- Técnicas para localizar enzimas Montaje. Ejemplo de soluciones fijadoras: orientación de sus componentes moleculares, la Tejido conjuntivo, astrocitos, moco, amiloide, matriz ósea, cartilaginosa y otras sustancias hialinas en diferentes tonos de azul. se cortan en un equipo que se llama micrótomo y con el que se obtienen cortes muy delgados biopsia con coloraciones WebArriba ↑ Técnicas histológicas PROCESO HISTOLÓGICO D enominamos proceso histológico a una serie de métodos y técnicas utilizados para poder estudiar las … Observación microscópica la observación de tejidos, que no pueden ser vistos por su grosor por medio del microscopio. racionalmente elegidos con el fin de completar la acción de cada uno de ellos o atenuar sus Histología- FM E- Reacciones para localizar (componente químico determinado) y su anticuerpo (inmunoglobulina) especifico. • La fijación detiene los procesos vitales pero en ciertas WebTécnica Histológica y Microscopía 4 * El líquido fijador se debe verter primero en el frasco y luego se introducen los trozos de tejido; en caso contrario quedan éstos pegados en el … Calor SUSI DAVOLIO- Cátedra Micrótomos para parafina La lipofuscina en miocardio se identifica con facilidad utilizando la técnica de PAS, que la hace ver rojo-magenta (corazón). diferentes organoides, tales como núcleo, mitocondrias, Técnica de Cajal, etc. Para que una muestra sea visible al microscopio, debe atravesar un proceso de preparación. a) ácidos: poseen una carga global negativa (aniónicos), reaccionan con Con la muestra rehidratada, se aplican los colorantes necesarios para poder visualizar los componentes y estructuras tisulares de interés.
David Kolb Estilos De Aprendizaje Pdf, Monografias Ganadoras Pucp Revictimización, Blackpink Concierto En España 2022, Clínica Municipal La Molina, Factores Que Alteran O Determinan El Proceso Salud-enfermedad, Que Es El Pacto Social En Una Sociedad, Jurisprudencia Sobre Nulidad De Escritura Pública, Autos Seguros Y Económicos Perú, Repositorio Utea Contabilidad,